酶免试剂盒的实验原理

        酶免试剂盒是专门用来定量检测血浆样本中的胰高血糖素样肽的总浓度。哺乳动物的GLP-1肽链的基本氨基酸序列*相同，如：小鼠、大鼠、猪、狗、猴、人等。该试剂盒仅适用于科学研究。

        该ELISA的设计是基于运用两个GLP-1特异性抗体与两个位点结合的“双位点夹心”技术。将标准品、质控品、和待测样品加入链霉亲和素包被的微孔板中。随后，将生物素偶联的GLP-1特异抗体和HRP标记的GLP-1特异抗体混合物添加到各个孔中。经过*个保温孵育期，形成了“链霉亲和素-生物素抗体- GLP-1（7-36）/（9-36）-HRP标记抗体”的“双位点夹心”结构，该复合体被微孔板的内壁吸附住。游离的HRP标记抗体和缓冲基质则在洗涤过程中被冲走。微孔板加入过氧化物酶基质并经过一段时间的反应后，然后用酶标仪测量吸光度。微孔板内壁的免疫复合体与GLP-1（7-36）/（9-36）的连接酶活性与样本中的总GLP-1数量成正比。

酶免试剂盒实验步骤：
1.将标准品、质控品和病人样本添加到微孔中；

2.在各孔中添加100µL抗体混合物；

3.在2-8度的室温下，静置培养20-24小时；

4.用洗涤缓冲液稀释液洗净条带；

5.在各孔中添加200 µL的TMB基质；

6.室温下静置20分钟；

7.添加50 µL终止液；

8.读取吸光度。