免疫印迹（western blot）技术服务*

免疫印迹（western blot）技术服务

◇样本制备

1. 悬浮细胞：取大约 1×10⁷个细胞，低速离心收集，弃去培养液，加入1ml PBS悬浮细胞，转入小离心管中，低速离心沉淀细胞，弃去PBS，放入-70℃冰箱保存。

2. 贴壁细胞：取大约1×10⁷个贴壁细胞，胰酶消化后加入PBS悬浮细胞，转入小离心管中，低速离心沉淀细胞，弃去PBS，放入-70℃冰箱保存。

3. 组织：采集新鲜组织（注意：生物体死亡后10分钟内取材料并保存好），组织块以PBS或生理盐水清洗干净，切为小块，放入-70℃冰箱中保存。

样本量：组织样本，质量大于100mg；细胞样本，细胞数大于1×10⁶；

◇蛋白质抽提：

实验对象为组织样品，取适量（250~500mg）新鲜组织样品或正确保存的组织样品，加1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂（或核蛋白抽提试剂），匀浆后抽提总蛋白（或核蛋白）。实验对象为细胞样品（细胞培养），每份样品取1×10⁶～1×10⁷细胞，PBS清洗细胞，去PBS加0.1ml~1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂（或核蛋白抽提试剂）抽提总蛋白（或核蛋白）。标本也可交给我们处理，组织标本每个10元，核蛋白或膜蛋白每个30元。

◇收费标准：

每张膜上做一种目的蛋白和相应的内参蛋白。每张膜上可以做8个样品。每张膜的费用是：800元。一抗另计，抗体为进口单克隆抗体，我公司可代购，其它试剂免费。