提 供 商： 上海西唐生物科技有限公司 资料大小： 图片类型： 下载次数： 200 次 资料类型： DOC 浏览次数： 211 次 相关产品：

详细介绍： 文件下载       ： 55229872   ：http://www.westang.com 大鼠Insulin定量EIA试剂盒使用说明   原理 本实验采用双抗体夹心 ELISA法。用抗大鼠Insulin单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 Insulin与单抗结合，加入酶标抗体，形成免疫复合物连接在板上，加入酶底物TMB，出现蓝色，加终止液硫酸，颜色变黄，在450nm处测OD值，Insulin浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中Insulin浓度。 试剂盒组成（2-8℃保存） 酶标板（Coated Wells） 96孔 酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate） 6ml 标准品（Standards）：6瓶 一套 20×浓缩洗涤液（Wash Buffer） 50ml 封板纸 一张 底物工作液（TMB Solution） 12ml 坐标纸 一张 终止液（Stop Solution） 12ml 准备试剂与收集血样 1.          收集标本：血清、血浆（EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，避免反复冻融。 2.          标准品*次使用时用0.5ml的蒸馏水溶解，放置半小时混匀后使用，用后放在-20oC保存。溶解后浓度分别为14、8、3.2、1.6、0.8、0 ng/ml。 3.          标本如果需要稀释可以用蒸馏水稀释。 4.         洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水） 检测程序 1.          建立标准曲线：设标准孔6孔，每孔各加入标准品50ul。 2.          加样：待测品孔每孔各加入待测样品50ul。 3.          每孔加酶标抗体工作液50ul。将反应板置37℃120分钟。（室温过夜可以提高灵敏度） 4.          洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。 5.          每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。 6.          每孔加入100ul终止液混匀。 7.          30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。 结果计算与判断 1.          所有OD值都应减除空白值后再行计算。 2.          以标准品14、8、3.2、1.6、0.8、0ng/ml为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。 3.          根据样品OD值在该曲线图上查出相应Insulin含量。 试剂盒性能              1.   灵敏度：zui小的Insulin 检测浓度小于0.4ng/ml。 2.        特异性：可同时检测重组或天然的大鼠Insulin。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。 3.        重复性：板内、板见变异系数均小于10％。 注意事项              1.   以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。  2.   洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致度误差及OD值错误地升高。              3.   板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。              4.   本试剂盒宜置4oC冰箱保存。  5.   本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！